本研究探讨了NLRP3/Caspase-1焦亡通路在糖尿病性勃起功能障碍（DMED）大鼠中的作用及伊木萨克片的干预机制。通过构建DMED大鼠模型，研究发现该通路的激活与阴茎海绵体内皮损伤密切相关，导致勃起功能下降。伊木萨克片和NLRP3抑制剂MCC950联合干预可显著改善大鼠的勃起功能和内皮功能，降低炎症因子表达，抑制细胞焦亡。研究结果为DMED的治疗提供了新的靶点和思路。
【摘要】目的：探究NLRP3/Caspase-1焦亡通路在糖尿病性勃起功能障碍（DMED）大鼠阴茎组织中的作用及伊木萨克片干预改善勃起功能的机制研究。
方法：（1）制备并筛选DMED大鼠模型，通过阿扑吗啡（APO）勃起实验、性行为学实验筛选出DMED大鼠，随机将大鼠分为DMED组（n=10）、伊木萨克片干预组（Y组，n=10）、NLRP3抑制剂组（MCC950组，n=15）和MCC950+Y组（n=20）。药物连续干预2w。动态观测大鼠生物学体征、随机血糖、勃起功能和性行为能力变化，2w后，检测大鼠海绵体内压/平均动脉压（ICP/MAP）的比值。（2）试剂盒检测大鼠糖化血红蛋白（GHb）。（3）HE染色观察阴茎组织形态学变化。（4）IHC、RT-qPCR、WB检测阴茎组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18、eNOS和ET-1的水平。（5）免疫荧光检测阴茎海绵体NLRP3、vWF和CD31的表达。（6）试剂盒检测L-乳酸脱氢酶（LDH）活性。
结果：（1）结果显示：成功制备并筛选DMED大鼠模型；相较于N组大鼠，DMED组大鼠饮水量、饮食量、尿量和血糖升高（P＜0.05），体重降低（P＜0.05）；相较于DMED组大鼠，药物干预0w时，MCC950组、Y组和MCC950+Y组大鼠饮水量、饮食量、尿量、体重和血糖无差异（P＞0.05）；相较于MCC950组和Y组大鼠，MCC950+Y组大鼠体重、饮水量、饮食量、尿量和血糖无差异（P＞0.05）；干预第1w及第2w，相较于N组大鼠，DMED组大鼠饮水量、饮食量、尿量和血糖升高（P＜0.05），体重降低（P＜0.05）；相较于DMED组大鼠，MCC950组、Y组和MCC950+Y组大鼠饮水量、饮食量、尿量、体重和血糖无差异（P＞0.05）；相较于MCC950组和Y组大鼠，MCC950+Y组饮水量、饮食量、尿量、体重和血糖无差异（P＞0.05）；ICP/MAP结果显示：相较于N组大鼠，DMED组大鼠ICP/MAP比值明显降低（P＜0.05）；相较于DMED组大鼠，Y组、MCC950组、MCC950+Y组大鼠ICP/MAP值升高（P＜0.05）；相较于Y组和MCC950组大鼠，MCC950+Y组大鼠ICP/MAP值升高（P＜0.05）。（2）糖化血红蛋白结果显示：药物干预后，相较于N组大鼠，DMED组大鼠糖化血红蛋白升高（P＜0.05）；而DMED组、Y组、MCC950组和MCC950+Y组间大鼠糖化血红蛋白无差异（P＞0.05）；（3）HE染色观察大鼠阴茎海绵体内皮细胞结果显示，DMED组细胞数量减少，内皮结构损伤加重，Y组、MCC950组和MCC950+Y组细胞数量增多，内皮结构损伤减轻。（4）RT-qPCR结果显示，相较于N组大鼠，DMED组大鼠阴茎组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18和ET-1mRNA表达升高（P＜0.05），eNOS mRNA表达降低（P＜0.05）；相较于DMED组大鼠，Y组、MCC950组、MCC950+Y组大鼠阴茎组织中焦亡相关因子和ET-1mRNA表达降低（P＜0.05），eNOS mRNA表达升高（P＜0.05）；相较于Y组和MCC950组大鼠，MCC950+Y组大鼠阴茎组织中焦亡相关因子和ET-1mRNA表达降低（P＜0.05），eNOS mRNA表达升高（P＜0.05）；免疫组化和蛋白免疫印迹结果显示，相较于N组大鼠，DMED组大鼠的阴茎组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18和ET-1蛋白水平升高（P＜0.05），eNOS蛋白水平降低（P＜0.05）；相较于DMED组大鼠，Y组、MCC950组、MCC950+Y组大鼠阴茎组织中焦亡相关因子和ET-1蛋白水平降低（P＜0.05），eNOS蛋白水平升高（P＜0.05）；相较于Y组和MCC950组大鼠，MCC950+Y组大鼠阴茎组织中焦亡相关因子和ET-1蛋白水平降低（P＜0.05），eNOS蛋白水平升高（P＜0.05）。（5）免疫荧光结果显示，相较于N组大鼠，DMED组大鼠的阴茎组织中NLRP3蛋白水平升高，CD31和vWF蛋白水平降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；相较于DMED组大鼠，Y组、MCC950组、MCC950+Y组大鼠阴茎组织中NLRP3蛋白水平降低（P＜0.05），CD31和vWF蛋白水平升高（P＜0.05）；相较于Y组和MCC950组大鼠，MCC950+Y组大鼠阴茎组织中NLRP3蛋白水平降低（P＜0.05），CD31和vWF蛋白水平升高（P＜0.05）。（6）LDH活性检测显示，相较于N组大鼠，DMED组大鼠的阴茎组织中LDH活力增加（P＜0.05）；相较于DMED组大鼠，Y组、MCC950和MCC950+Y组大鼠阴茎组织中LDH活力降低（P＜0.05）；相较于Y组和MCC950组大鼠，MCC950+Y组大鼠阴茎组织中LDH活力降低（P＜0.05）。
结论：DMED可能通过NLRP3/Caspase-1焦亡通路参与阴茎海绵体内皮损伤从而降低大鼠勃起功能；伊木萨克片可能通过抑制此通路减轻DMED大鼠阴茎海绵体内皮功能障碍进而改善大鼠勃起功能。
【关键词】糖尿病性勃起功能障碍伊木萨克片阴茎海绵体内皮损伤勃起功能中药药理
【语种】中文
【分类号】R587.2（内分泌腺疾病及代谢病）R285.5（中药学）
